Коррекция холостой пробы при измерении оптической плотности

Холостая проба позволяет оценить вклад реагентов и среды без вклада определяемого вещества в выбранной методике. Если компоненты складываются на шкале оптической плотности, этот вклад можно вычесть. Простая разность не заменяет контроль чистоты кюветы, стабильности опоры и пригодности методики.

От оптического сигнала к лабораторному результату

Фотометрический тракт измеряет свет, а концентрация появляется после преобразования этого сигнала по выбранной аналитической методике. Опорный канал, холостая проба и контрольный материал выполняют разные функции. Опора задаёт сравнение интенсивностей, холостая проба характеризует вклад среды, а контроль проходит через определённую последовательность измерения и обработки.

Расчётная модель

Суммарное показание пробы и реагентного фона составляет 0,620 единицы оптической плотности. При аддитивном фоне вычислим разность с холостой пробой, подготовленной тем же способом.

Входная величина x — Показание холостой пробы.

y = 0,62 − x

Результат y — Скорректированная оптическая плотность.

Подстановка для одного случая

Возьмём второе условие таблицы. При x = 0,04 выражение принимает вид 0,62 − 0,04. После вычисления получаем y ≈ 0,58. В соседних строках меняется только входная величина.

Показание холостой пробы	Скорректированная оптическая плотность	Изменение y к первой строке
0,01	0,61	0
0,04	0,58	−0,03
0,08	0,54	−0,07
0,12	0,5	−0,11

График. Скорректированная оптическая плотность в зависимости от Показание холостой пробы. Значения приведены в таблице. — Точки соответствуют строкам таблицы. Пунктир соединяет рассмотренные условия.

Как проверить вывод

Используйте одну и ту же длину волны и температурный режим для пробы и холостой кюветы. Вычитание результатов с разных каналов добавляет инструментальную разность.

Граница применимости

Вычитание фона не исправляет нелинейность или несовпадение состава матриц. Способ коррекции должен соответствовать конкретной методике.

При сравнении данных сохраняют длину волны, геометрию кюветы, время отсчёта и принятый способ коррекции. В кинетическом исследовании важны также начало реакции и участок оценки наклона. Неопределённость результата может возникнуть ещё до фотометрии при дозировании, разведении или подготовке пробы.

Проверьте себя

При каком из приведённых входных значений получится 0,61 по столбцу «Скорректированная оптическая плотность»?

Показать разбор

Подстановка в выражение даёт 0,62 − 0,01 ≈ 0,61. Входное значение — 0,01.

Оборудование и характеристики

Биохимические анализаторы в каталоге ИНФОМЕД. Ниже приведены примеры исполнений и сведения из их карточек. Значения учебного опыта заданы отдельно.

Оборудование	Параметр карточки	Описание исполнения
DiaSys respons 910 — биохимический анализатор	Диапазон оптической плотности	0–3,0 OD; разрешение 0,0001 OD
DiaSys respons 910 — биохимический анализатор	Производительность	до 150 тестов/ч для монореагентов; до 100 тестов/ч для двухкомпонентных методик
Автоматический биохимический анализатор Mindray BS-200E	Оптическая плотность	0–3,3 Abs в пересчёте на 10 мм; разрешение 0,0001 Abs
Автоматический биохимический анализатор Mindray BS-200E	Реакционный ротор	80 многоразовых кювет; оптический путь 5 мм
Полуавтоматический биохимический анализатор SINNOWA BS-3000M	Оптическая плотность	0,000–3,500 ед.ОП
Полуавтоматический биохимический анализатор SINNOWA BS-3000M	Память результатов	6000 измерений и 5000 результатов контроля качества в описанном типе

DiaSys respons 910 — биохимический анализатор

Реакционный ротор содержит сто пять одноразовых пластиковых кювет. Это уменьшает зависимость от многократной промывки оптических ячеек, одновременно делая запас кювет обязательной частью рабочего планирования. Двенадцать длин волн обеспечивают монохроматические и бихроматические приложения; температура реакции поддерживается на уровне 37 ± 0,2 °C. Фотометрические определения натрия, калия или хлора на этой платформе нельзя описывать как ISE: это другой измерительный принцип. Набор электролитов и методики фиксируют по фактически используемым системным реагентам.

Карточка оборудования ИНФОМЕД

Автоматический биохимический анализатор Mindray BS-200E

Оптическая система BS-200E использует галогенно-вольфрамовый источник и дифракционную решётку в схеме обратной оптики. Доступны двенадцать длин волн от трёхсот сорока до восьмисот нанометров. Поддерживаются монохроматические и бихроматические измерения, конечная точка, фиксированное время и кинетика. Такое сочетание позволяет реализовать различные биохимические реакции в пределах подтверждённых приложений. Бихроматическая регистрация может использоваться для коррекции фонового вклада в конкретной методике, но сама по себе не делает результат свободным от любых свойств исследуемой пробы.

Карточка оборудования ИНФОМЕД